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扫描电镜
发布时间:2017-03-06 | 浏览:1949次 【关闭此页

  在光学显微镜下小于0.2mm的一些细微结构,即便是再提高放大倍数也无法看清,这些结构称为亚显微结构或超微结构。
要想看清这些结构,就必须选择波长更短的光源,以提高显微镜的分辨率。目前扫描电镜的分辨力为6~10nm,扫描电镜的
最大有效放大倍率为0.2mm/10nm=20000X。
      样品制备简单,放大倍数大,分辨率高,场景深,图像立体感丰富,易于识别和解释,广泛应用于生物学和医学等领域。
  实验步骤:
        1. 清洗:一般用pH7.2磷酸盐缓冲
        2. 固定:常规法用2.5﹪戊二醛前固定24h(放入0-4℃冰箱中)即可。一些特殊样品,如幼嫩的、含水量高的样品最好还
        是用四氧化钠后固定2h
        3. 脱水:乙醇系列30﹪-50﹪-70﹪-85﹪-95﹪-100﹪(2次)逐级脱水,每级10-15min,块大的应适当摇动,保
        证脱水干净
        4. 中间液代换:分两步。第一步用醋酸(异)戊酯:乙醇=1:1的混合液浸泡10min,第二步用醋酸异戊酯浸泡10min,适
        当摇动
        5. 临界点干燥:代换后的样品转入样品篮中,放进预冷的临界点干燥仪样品室内,盖好室盖后注入液体二氧化碳,以淹没
        样品为准,先升温至15℃加热10min,再升温至35℃让其气化,观察液体全气化后慢慢放气,必须待气放尽才能开盖取样
        6. 粘贴样品:一般样品可用双面胶带粘贴,如果样品块大,导电性差,必须用导电胶粘贴
        7. 镀膜后入镜观察

示例图片:

 

 

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